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内标荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒定量中的应用
被引:6
作者:
冯艳铭
李智涛
邵大哓
李振勇
王樯
屈凌波
赵玉芬
机构:
[1] 郑州大学化学系化学生物重点实验室
[2] 华美生物工程公司
[3] 郑州大学化学系化学生物重点实验室 河南郑州
[4] 河南洛阳
[5] 河南郑州
来源:
关键词:
聚合酶链反应;
乙型肝炎病毒;
荧光探针核酸杂交;
内标荧光定量;
D O I:
10.13602/j.cnki.jcls.2004.05.024
中图分类号:
R446.5 [微生物学检验];
学科分类号:
100208 ;
摘要:
目的 建立内标荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒 (HBV)DNA ,以避免PCR扩增过程中可能出现的假阴性或部分抑制。方法 在TaqMan荧光探针杂交PCR技术检测HBV载量的基础上 ,结合内标参照的方法指示PCR的扩增效率。结果本检测方法具有很好的特异性、重复性 ,检测敏感度达到 1× 10 3 copies/ml。经过对 382例乙肝患者标本测定证实 ,标志物为HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清检出率为 10 0 % ,标志物为HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清检出率为 72 .0 % ,与Roche试剂比较 ,两者的相关系数为 0 .987。结论 本法快速、简便、特异性好、能指示病毒感染程度。
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