小麦RAPD分析中温度循环参数的优化

被引：19

作者：

刘红彦

牛永春

钟鸣

不详

机构：

[1] 中国农业科学院植物保护研究所

[2] 中国农业科学院植物保护研究所北京

[3] 北京

[4] 北京

来源：

麦类作物学报 | 2001年 / 04期

关键词：

小麦; RAPD; 优化;

D O I：

暂无

中图分类号：

S512.1 [小麦];

学科分类号：

摘要：

为了解决小麦材料 RAPD分析中的重复性差、多态性低等问题 ,对反应中的温度循环参数进行了优化研究。通过比较不同变性时间、复性温度和升温速度等的扩增效果 ,设计出了适于小麦 RAPD分析的 PCR程序 :94℃预变性 5 m in;开始的 5个循环为 94℃ 1min,38℃ 1m in,0 .3℃ / s升温 ,72℃ 2 min;后 40个循环为 94℃ 10 s,38℃ 1min,0 .3℃ / s升温 ,72℃ 2 min;最后 72℃ 5 m in。在后 40个循环中用 1～ 2 s的变性时间 ,则能够有目的地扩增 6 0 0 bp左右及以下片段。利用该程序 ,每条引物检测的位点数平均达 17.6个左右 ,高于一般报道的 1～ 10个。该程序在小麦遗传多样性研究、分子标记鉴定等方面有较高的实用价值

引用

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页数：4

共 6 条

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