dsRNA对家蚕核多角体病毒(BmNPV)复制的抑制作用

被引：16

作者：

徐颖

朱成钢

金勇丰

张耀洲

不详

机构：

[1] 浙江大学生物化学研究所

[2] 浙江理工大学生物化学研究所杭州

[3] 杭州

来源：

科学通报 | 2004年 / 11期

关键词：

BmNPV; RNAi; dsRNA; 复制; 抑制;

D O I：

暂无

中图分类号：

S884 [蚕的病虫害及其防治];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

以BmNPV复制必需的DNA解旋酶基因和DNA聚合酶基因为靶序列, 人工设计并合成了长度分别为435(Ap1), 300(Ap2)和399 bp(AH)的dsRNAs, 利用TransMessengerTM Transfection Reagent转染家蚕细胞, 研究其对BmNPV复制的抑制效果. 结果表明, 在野生型病毒BmNPV 感染家蚕细胞实验中, Ap2和AH这2个dsRNA能够有效地抑制病毒DNA的复制, 并且在转染dsRNA后第4天抑制效果最佳, 它们使病毒滴度(PFU/mL 值)降低了 103～104, 而另外的 dsRNA(Ap1)没有明显的抑制效果. RT-PCR 和DNA斑点杂交也证实了2种目的基因的表达水平和病毒DNA的量发生了明显的下调. 此外, 用荧光显微镜观察dsRNA在细胞内的定位, 发现在转染24 h后dsRNA开始在细胞核的周围呈不连续的聚集状态.

引用

页码：1073 / 1078

页数：6

共 6 条

[1]

昆虫病毒分子生物学[M]. 中国农业科技出版社 , 吕鸿声著, 1998

[2]

RNAi: nature abhors a double-strand[J] . Current Opinion in Genetics & Development . 2002 (2)

[3] ATP requirements and small interfering RNA structure in the RNA interference pathway [J].

Nykänen, A ;

Haley, B ;

Zamore, PD .

CELL, 2001, 107 (03) :309-321

[4]

Genes and Mechanisms Related to RNA Interference Regulate Expression of the Small Temporal RNAs that Control C. elegans Developmental Timing[J] . Alla Grishok,Amy E. Pasquinelli,Darryl Conte,Na Li,Susan Parrish,Ilho Ha,David L. Baillie,Andrew Fire,Gary Ruvkun,Craig C. Mello.Cell . 2001 (1)

[5]

dsRNA-mediated gene silencing in cultured Drosophila cells: a tissue culture model for the analysis of RNA interference[J] . Natasha J. Caplen,Jamie Fleenor,Andrew Fire,Richard A. Morgan.Gene . 2000 (1)

[6]

Double-Stranded RNA-Specific Adenosine Deaminase: Nucleic Acid Binding Properties[J] . Yong Liu,Alan Herbert,Alexander Rich,Charles E. Samuel.Methods . 1998 (3)

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