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不同的样本处理方法对乙型肝炎病毒DNA检测的影响
被引:5
作者:
王惠民
谢晓谦
机构:
[1] 江苏省南通医学院附属医院,江苏省南通市第一人民医院
来源:
关键词:
乙型肝炎病毒,聚合酶链反应,DNA.病毒;
D O I:
暂无
中图分类号:
R512.62 [];
学科分类号:
100401 ;
摘要:
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)的聚合酶链反应(PCR)常规检测中血清样本的最佳处理方法。方法分别用不同缓冲液(PBS与TE)对血清进行1:1或1:10稀释,不同浓度去污剂(TritonX-100与NP40)及巯基乙醇处理血清样本,以及用硫氰酸胍-酚-氯仿抽提、蛋白酶K消化、碱裂解、辛酸钠裂解等方法处理血清样本,比较这些方法对PCR法检测血清HBVDNA敏感度的影响,并进行了辛酸钠最适浓度实验。结果在所比较的18种方法中发现硫氰酸胍-酚-氯抽提法、碱裂解法及辛酸钠法有较高的检测敏感度,而辛酸钠法有更好的重复性,方法最为简便。结论终浓度30~50mmol/L辛酸钠最适用于PCR法常规检测HBVDNA的血清处理
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