转座子Tn5诱导菊欧氏杆菌产细菌素菌株突变的研究

通过接合的方法将转座手Tn5从供体菌（Escherichia coli s17/pZJ25t:∶Tn5）转移到菊欧氏杆菌（Erwinia chrysanthemi）产细菌素菌株EchB3上。平板LB上的接合频率约为0.8×10-8/每个受体细胞,而滤膜上的接合频率为0.3×10-7/每个受体细胞。2200个接合子只带有转座子Tn5的卡那霉素（km）抗性标记,而没有载体上的氮霉素（Cm）抗性标记,也没有检测到载体质粒。试验证明供体菌中的载体质粒（pZJ25）不能在EchB3中复制表达。因此供体菌株是对菊欧氏杆菌基因分析的良好工具。从2200个接合子中提取全DNA和质粒DNA转化到去质粒的菊欧氏杆菌菌株EchB3rcl,能得到恢复产细菌素的转化子,从而进一步肯定了菊欧氏杆菌EchB3中的质粒在产细菌素中的作用。