猪水肿病毒素A亚单位基因的克隆及表达的尝试

被引：2

作者：

成大荣

徐建生

董国雄

李俊宝

机构：

[1] 扬州大学畜牧兽医学院动物医学系!扬州

来源：

中国兽药杂志 | 2000年 / 05期

关键词：

仔猪水肿病; 毒素A; 亚单位基因; 克隆; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

S858.28 [猪];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

以聚合酶链式反应 ( PCR)技术从大肠杆菌 TB1中扩增出猪水肿病毒素 ( SLT- IIe)的 A亚单位基因的 960 bp。将此 PCR扩增产物 ( slt- IIe A)在 Eco RI和 Bam HI位点间克隆进质粒p UC1 8中 ,获得了重组质粒 p1 8slt- IIe A,经 Micro Genic computer program分析证明在其整个序列中含有与已发表的 slt- IIe序列相同的序列 ,说明质粒 p1 8slt- IIe A是含有 slt- IIe A的重组质粒。切割重组质粒 p1 8slt- IIe A,将 slt- IIe A基因插入到表达性质粒载体 p GEX- 6p- 1中处于谷胱苷肽转移酶 ( GST)基因的下游 ,构建成重组质粒 ppslt- IIe A,并证明其中含有 slt- IIe A基因。然而 ,与原初预计结果相反 ,受到质粒 ppslt- IIe A转染的大肠杆菌 BL2 1 (名为重组质粒 PPSLT- IIe A)在不同温度条件、不同培养时间和不同 IPTG浓度下 ,却未表达预期的融合蛋白 GST- SLT- IIe A。本文对未能表达一事的可能原因进行了讨论。

引用

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共 5 条

[1] 类志贺氏菌毒素Ⅱ型变异体B亚单位基因的表达与鉴定 [J].

成大荣 ;

徐建生 ;

董国雄 ;

李俊宝 .

中国预防兽医学报, 1999, (05) :30-34

[2] 类志贺氏菌毒素型变异体基因的克隆与鉴定 [J].

成大荣 ;

徐建生 ;

董国雄 ;

李俊宝 .

扬州大学学报(自然科学版), 1999, (03) :25-28

[3]

分子克隆实验指南[M]. 科学出版社 , (美)J.萨姆布鲁克（J.Sambrook）等著, 1992

[4]

Vaccination with genetically modified Shiga-like toxin IIe prevents edema disease in swine. Bosworth BT, Salmule JE, Moon HW, et al. Infection and Immunity . 1996

[5]

Differentiation of genes coding for Escherichia coli verotoxin 2 and the verotoxin associated with porcine edema disease （ VTe ） by the polymerase chain reaction. Johnson WM, Pollard DR, Lior H, et al. Journal of Clinical Microbiology . 1990

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