转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得

被引：22

作者：

郭兆奎 ^{[1
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杨谦 ^{[1
]}

姚泉洪 ^{[2
]}

万秀清 ^{[3
]}

颜培强 ^{[3
]}

机构：

[1] 哈尔滨工业大学生命科学与工程系

[2] 上海市农业科学院生物技术中心

[3] 黑龙江省烟草科学研究所

来源：

中国生物工程杂志 | 2005年 / 12期

关键词：

AtKup1基因; 转基因烟草; K+含量;

D O I：

10.13523/j.cb.20051205

中图分类号：

S572 [烟草（菸草）];

学科分类号：

0901 ;

摘要：

提取拟南芥幼根总RNA,进行RTPCR逆转录,产物测序,将其构建到含Km(带内含子)筛选标记的植物双元表达载体上,根癌农杆菌介导法将AtKup1基因导入烟草,对转化子进行PCR扩增、GUS染色、Southern杂交和AtKup1基因mRNA荧光定量PCR分析,并进行烟叶内在成分化验分析。PCR获得2100bp左右扩增产物,测序结果证实扩增产物序列与拟南芥AtKup1基因(GenbankNo:AF029876)一致;得到GUS染色阳性的AtKup1基因转化烟草材料29株。经PCR扩增、分子杂交检测证实AtKup1基因已整合到转基因烟草的基因组,荧光定量PCR分析可以在幼根中检测到AtKup1基因的mRNA转录。烟叶含钾量化验结果表明导入的AtKup1基因在转化材料中成功表达,使烟叶含钾量提高约45%。

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页数：5

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