检测猪链球菌2型胞外因子(EF)的PCR方法的建立附视频

被引:10
作者
倪艳秀
何孔旺
王继春
何家惠
还红华
陆承平
姚火春
机构
[1] 江苏省农科院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室!南京
[2] 江苏省农科院农业部畜禽疫病
关键词
猪链球菌2型; 胞外因子(EF); PCR;
D O I
暂无
中图分类号
S852.611 [];
学科分类号
090601 ;
摘要
根据猪链球菌 2型的ef基因和ef 基因合成了一对可扩增长度为 6 2 6bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测胞外因子 (EF)的PCR方法。用HaeⅡ内切酶进行酶切 ,获得了与预期一致的 35 4bp和 2 72bp的两个片段。并进行了PCR的特异性试验和敏感性试验。对马腺疫链球菌兽疫亚种、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和猪肺炎霉形体的PCR检测结果均呈阴性 ;检测的敏感度可达 10 0个细菌。另外 ,对 9株猪链球菌 2型菌株进行了检测 ,7株呈EF阳性 ,1株呈EF 阳性 ,1株呈EF阴性 ;对 15份正常屠宰猪扁桃体分离物的检测结果 1份为阳性。实验结果表明此法特异性和敏感性均很高 ,可作为EF快速诊断和流行病学调查的手段
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共 1 条
[1]  
精编分子生物学实验指南[M]. 科学出版社 , (美)F.奥斯伯(FrederickM.Ausubel)等著, 1998