人卵GST-ZP3融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性的检测

被引：7

作者：

金文辉 ^{[1
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郭焱 ^{[1
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崔健丽 ^{[2
]}

黄晶 ^{[3
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于庭 ^{[4
]}

张学英 ^{[5
]}

机构：

[1] 长春中医药大学

[2] 吉林大学第四医院(汽车厂总医院)

[3] 吉林大学第一医院

[4] 吉林大学第二医院

[5] 吉林大学中日联谊医院

来源：

中国妇幼保健 | 2008年 / 23期

关键词：

人卵透明带3; 表达; 纯化; 免疫原性;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的:在大肠杆菌中表达人卵透明带3(Human zona pellucida3,HuZP3)蛋白并对其进行纯化。方法:将HuZP3基因的核心片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经过酶切和序列分析后,用重组质粒转化E.coli BL21,经IPTG诱导产生GST-HuZP3融合蛋白并通过Glutathione Sepharose 4B纯化。以纯化的融合蛋白免疫纯系Balb/C小鼠制备抗血清。抗血清的效价采用ELISA检测。结果:成功地构建GST-HuZP3融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中高效表达特异性的GST-HuZP3融合蛋白。以该融合蛋白免疫小鼠获得高效价抗GST-HuZP3抗血清,且该抗血清可识别大肠杆菌表达的重组ZP3。结论:获得高表达的GST-HuZP3融合蛋白并证实其具有良好的免疫原性,可作为抗原研制开发检测不孕妇女体内是否存在抗自身ZP3抗体的诊断试剂盒。

引用

页码：3311 / 3314

页数：4

共 4 条

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