葡萄糖转运蛋白1基因转染对系膜细胞功能的影响

目的通过建立葡萄糖转运蛋白 １（ＧＬＵＴ１）的基因转染系统，观察 ＧＬＵＴ１的过度表达对系膜细胞功能的影响。方法利用逆转录病毒载体建立 ＧＬＵＴ１基因转染的大鼠系膜细胞（ＭＣＧＴ１），以β－半乳糖苷酶转染细胞（ＭＣＬａｃＺ）为对照。用２－脱氧－３Ｈ－萄萄糖（２－ＤＧ）测定细胞葡萄糖摄入，流式细胞仪分析细胞表型，３Ｈ－脯氨酸掺入和流式细胞仪分别检测细胞胶原和纤维连接蛋白（ＦＮ）的合成，逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测细胞胶原ＩＶ、ＦＮ的表达。结果ＭＣＧＴ１的２－ＤＧ摄入率明显高于ＭＣＬａｃＺ［（７４１．０±６０．５）ｄｐｍ·μｇ ｐｒｏｔ－１比（９２．２±９．０）ｄｐｍ·μｇ ｐｒｏｔ－１，Ｐ ＜０．０１］。动力学分析发现 ＭＣＧＴ１的 Ｖｍａｘ是 ＭＣＬａｃＺ的 ３ ．７倍，而两者 Ｋｍ值无明显差别。在相同的葡萄糖浓度下，ＭＣＧＴ１的乳酸生成增多，表现出细胞体积增大、ＲＮＡ／ＤＮＡ和蛋白质／ＤＮＡ比值增高等细胞肥大表型。与对照相比，ＭＣＧＴ１的胶原和ＦＮ合成与表达明显增加。结论ＧＬＵＴ１的过度表达使系膜细胞具有糖尿病肾病（ＤＮ）的细胞表型。ＧＬＵＴ１的功能状态直接影响系膜细胞的糖代谢及功能变化。