蛋白质嵌入脂质体的研究——Ⅱ.猪心线粒体腺三磷酶复合体在脂质体上进行重组的研究

本文报导从猪心线粒体内膜腺三磷酶复合体拆离疏水蛋白（基部、F0）,成功地与偶联因子F1组装在脂质体上。并比较了疏水蛋白嵌入脂质体的三种方法（超声法、胆酸盐稀释法、胆酸盐透析法）的重组效果。（1）摸索了从线粒体、亚线粒体提取活力较高的疏水蛋白（F0）的最适条件。当F0嵌入脂质体后,腺三磷酶水解活力增高4～6倍,并表现出对寡霉素敏感的特性,酶活力受寡霉素抑制约50%左右。（2）将可溶性腺三磷酶（F1）与嵌有F0的脂质体（LF0）进行重组,32Pi-ATP交换活力、腺三磷酶水解活力以及萤光强度的增加都表明重组获得成功。（3）根据腺三磷酶抑制剂（寡霉素、二环己基碳二亚胺）和解偶联剂（碳酰氰-P-三氟甲氧苯腙）等对重组后上述各项指标的影响,也都表明重组获得成功。（4）对三种嵌入方法（超声、胆酸盐稀释法、胆酸盐透析法）的重组效果进行了比较。实验结果表明,各项指标的表现往往并不一致,重组后32Pi-ATP交换活力以超声法为最高,胆酸盐透析法交换活力最低。