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豇豆胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及对烟草的遗传转化
被引:7
作者:
刘芫
赵倩
敖光明
毛炎麟
机构:
[1] 北京农业大学农业生物技术国家重点实验室
[2] 北京农业大学农业生物技术国家重点实验室 北京
[3] 北京
来源:
关键词:
胰蛋白酶抑制剂基因;
克隆;
序列分析;
转化;
烟草;
D O I:
暂无
中图分类号:
学科分类号:
摘要:
以豇豆(Vigna unguiculata Walp)上农33-47的未成熟子叶为材料,分离mRNA,反转录合成cDNA。以cDNA为模板,经PCR扩增得到胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因。序列分析结果与Hilder等报道的California Black-eye的CpTI基因仅相差一个核苷酸。两者编码的氨基酸序列完全一致。将CpTI基因与CaMV 35S启动子和NOS 3’终止子连接,构建成分别含有不同拷贝的目的基因的表达载体。用直接法将表达载体转入农杆菌LBA4404(pAL4404)菌株,用此菌株转化烟草,在抗性培养基上诱导出再生植株。CpTI基因的表达水平及抗虫性正在研究中。
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