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白菜RAPD反应条件的优化
被引：13
作者：
张鲁刚
王鸣
陈杭
刘玲
SamuelS.M.Sun
机构：
[1] 西北农林科技大学蔬菜花卉研究所!陕西杨陵
[2] 西北农林科技大学园艺系!陕西杨陵
[3] 国家蔬菜技术工程中心!北京
[4] 香港中文大学生物系!香港新界
来源：
关键词：
大白菜;
RAPD;
反应条件;
D O I：
暂无
中图分类号：
S634.1 [大白菜];
学科分类号：
摘要：
以芜菁、大白菜及其杂交 1代为试材 ,系统分析了 Mg Cl2 浓度、d NTP浓度、随机引物浓度、模板 DNA用量、Taq DNA聚合酶浓度以及不同来源扩增缓冲液对 RAPD反应的影响 ,建立了一套稳定的 RAPD反应体系。该体系反应体积为 2 0μL,Mg Cl2 浓度为 1 .5mmol/L ,d NTP浓度为 2 0 0μmol/L ,随机引物浓度为 0 .4μmol/L ,模板 DNA为 2 0 ng,TaqDNA聚合酶为 6.67μmol/( L· min)。在 8种热循环条件下 ,该体系具有稳定的重现性 ,其扩增程序为 :94℃ /1′→ 36℃ /2 0″→ 72℃ /1 0″预扩增 2循环 ;94℃ /1 0″→ 36℃ /1 5″→ 72℃ /70″扩增38循环 ;72℃ /4′延伸效果最好
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