基因芯片检测转基因油菜

被引:17
作者
黄文胜
潘良文
粟智平
缪海珍
朱水芳
李瑶
机构
[1] 动植物检疫实验所
[2] 上海出入境检验检疫局
[3] 上海博星基因芯片有限公司
关键词
转基因油菜; 基因芯片; 转基因检测; 多重 PCR;
D O I
暂无
中图分类号
S565.4 [油菜籽(芸薹)];
学科分类号
摘要
在设计转基因油菜(Brassica napus)的基因芯片检测方法时,根据油菜中所转入的外源基因,选择了 CaMV35S 启动子、FMV35S 启动子、Nos 终止子、Bar 基因、Bamase 基因、Barstar 基因、EPSPS 基因、GOX 基因、PAT 基因和内源基因 Fbp 等设计了引物对与探针,并制备了寡核甘酸芯片,通过多重 PCR 对样品核酸进行扩增和荧光标记后,将 PCR 产物与芯片杂交,检测油菜样品中所含的外源基因。结果表明,实验有较好的特异性和重复性,在检测低含量的转基因油菜时灵敏度可达到0.5%。由于采用了多重 PCR 和芯片的多基因并行杂交的技术,一次可同时检测10个基因,在检测多品种混合的转基因油菜商品时具有独特优势。
引用
收藏
页码:588 / 592
页数:5
相关论文
共 5 条
  • [1] Ramsay G.DNA chips:state-of-the art. Nature Biotechnology . 1998
  • [2] Cheng J,Waters L C,Fortina P,et al.Degenerate oligonucleotide primed-polymerase chain reaction and capillary electrophoretic analysis of human DNA on microchip-based devices. Analytical Biochemistry . 1998
  • [3] Livak K J,Flood S J A,Marmaro J,et al.Oligonucleotides with fluorescent dyes at opposite ends provide a quenched probe system useful for detecting PCR product and nucleic acid hybridization. PCR Methods and Applications . 1995
  • [4] Schena M,Shalon D,Hellor R,et al.Parallel human genome analysis:Microarray-based expression monitoring of 1000 genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 1996
  • [5] Marshall A,Hodgson J.DNA chips:an array of possibilities. Nature Biotechnology . 1998