番茄花叶病毒外壳蛋白基因及3′端非编码区的克隆、序列分析及其表达

根据已报道的番茄花叶病毒Ｌ株系（ＴｏＭＶ Ｌ）序列人工合成引物，经ＲＴ ＰＣＲ扩增并克隆了我国番茄花叶病毒分离物（ＴｏＭＶ Ｓ１）的外壳蛋白ＣＰ基因及３′端非编码区。序列测定结果表明，所得ｃＤＮＡ共长６８２个核苷酸，其中ＣＰ基因含４８０个核苷酸，编码１５８个氨基酸，３′端非编码区含２０２个核苷酸，其核苷酸序列与ＴｏＭＶ Ｌ株系具有９９．５％的同源率。将该基因片段克隆到ｐＧＥＭＥＸ １载体中，转入Ｅ．ｃｏｌｉ后诱导表达，经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测证明，该基因已在大肠杆菌中正确表达。这是我国首次报道ＴｏＭＶＣＰ基因序列。