血浆游离氨基酸的柱前衍生反相高效液相色谱分析及其在临床检测中的应用

用邻苯二甲醛（OPA）-9-芴基甲氧基羰酰氯（FMOC）柱前衍生反相高效液相色谱法测定了婴幼儿血浆中的游离氨基酸。衍生由自动进样器在线自动完成;氨基酸的衍生物用Hypersil ODS反相柱分离,荧光检测器检测;流动相A为10 mmol.L-1pH 7.2的磷酸盐溶液（PB）,含0.5%（φ）四氢呋喃;流动相B为PB-甲醇-乙腈（体积比50∶35∶15）;用二元线性梯度程序洗脱,0 min时A为100%,B为0%;25 min时A为0%,B为100%。本法在25 min内使22种氨基酸全部得到良好分离,分离度大于1.5,最小检出限为1 nmol.mL-1,在20～300 nmol.mL-1浓度范围内,22种氨基酸的峰面积和浓度之间的线性相关系数在0.982～0.999之间,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.05%0.50%和0.7%2.9%,回收率为98%101%。用本法在医院送检的血浆样品中检出了高甘氨酸血症、苯丙酮尿症、精氨琥珀酸血症、胍氨酸血症、同型半胱氨酸尿症、枫糖尿症和酪氨酸血症等氨基酸遗传代谢缺陷症。