人三叶因子3在毕赤酵母中表达条件的研究

被引:11
作者
王艳茹
方敏
安琳
李令媛
茹炳根
机构
[1] 北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室,北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室,北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室,北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室,北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室北京,北京,北京
关键词
三叶因子3; 毕赤酵母; 表达; 发酵;
D O I
暂无
中图分类号
Q986 [分子人类学];
学科分类号
100112 [医学生物化学与分子生物学];
摘要
为提高人三叶因子 3 (HumanTrefoilfactor 3 ,hTFF3 )在毕赤酵母中的表达量 ,研究了转化子生长的培养条件 ,包括不同碳源对转化子生长的影响和接种量、甲醇浓度、pH值、摇瓶转速及不同诱导时间对人三叶因子 3表达的影响。结果表明转化子在生长阶段加入葡萄糖生长旺盛 ,培养 14h后OD6 0 0 就可达到 5 0。在 10 0mL生长培养基上的菌液以 1∶1接入诱导培养基时蛋白表达量最高 ;转化子在 1%的甲醇、pH6 0、摇瓶转速 2 4 0r min的条件下诱导4 8h ,菌体密度OD6 0 0 为 15 ,目的蛋白表达量达到 2 0mg L。用 5L发酵罐进行了高密度发酵 ,经 2 %甲醇 3 2h诱导 ,最终菌体密度OD6 0 0 达到 12 0 ,每升发酵液中含目的蛋白 10 0mg。
引用
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