标本处理对聚合酶链反应测定乙肝病毒核酸的影响

被引:30
作者
李金明
王露楠
邓巍
不详
机构
[1] 卫生部北京医院卫生部临床检验中心
关键词
聚合酶链反应; 标本制备; DNA,病毒;
D O I
暂无
中图分类号
学科分类号
摘要
目的 研究对血清标本进行乙型肝炎病毒 (HBV)DNA聚合酶链反应 (PCR)测定前的最佳标本处理方法。方法 使用煮沸裂解方法和核酸纯化方法同时处理 2份HBVDNA含量不同血清标本及 3份溶血和正常血清标本 ,比较荧光定量PCR测定的重复性及测定值的差异。结果 煮沸裂解法处理 2份标本所得结果的重复性 (变异系数CV分别为 0 2 16 5和 0 32 6 2 )明显差于对样本进行核酸纯化后的测定重复性 (CV分别为 0 0 6 99和 0 10 92 ) ;并且 ,当标本中血红蛋白含量大于 5 .89μg/L时 (肉眼未见有明显溶血 ) ,采用煮沸裂解法处理标本所得HBVDNA量较核酸纯化方法所得值低约 2个数量级 (P <0 .0 5 )。结论 在HBVDNAPCR检测时 ,煮沸裂解法不适合用来处理血清标本 ,而应使用核酸纯化方法
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