水稻蜡质基因5＇上游区缺失对基因表达的影响

为研究水稻蜡质基因（ｗａｘｙ）５＇上游调控区中存在的顺式作用元件，我们将水稻ｗａｘｙ基因翻译起始声、（ＡＴＧ）５＇上游３．４ｋｂ（－２１１８～＋１２９１ｂＰ）片段经外切核酸酶ＥｘｏⅢ部分酶解，得到一系列５＇端缺失的片段。将这些缺失片段分别与ｇｕｓ基因编码区连接，构建成融合质粒，经ＰＥＧ介导引入水稻原生质体，２６℃培养４８ｈ后，定量测定ＧＵＳ酶活力，并以同时导入的由３５Ｓ启动子指导的荧光素酶（ＬＵＣ）基因表达的酶活力作为内对照。结果表明，ＧＵＳ酶活性随５’上游调控区长度的减少而逐渐减弱。由─８６１ｂｐ缺失至─６４０ｂＰ时，ｇｕｓ基因表达水平有较明显的降低，推测在该区域中可能存在一个顺式作用元件区。