抗重组志贺毒素ⅡB亚基单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

被引：4

作者：

陈洪章 ^{[1
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邹全明 ^{[1
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罗萍 ^{[1
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毛旭虎 ^{[1
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曾浩 ^{[1
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马颖 ^{[1
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余抒 ^{[1
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曾明 ^{[2
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机构：

[1] 第三军医大学临床微生物学及临床免疫学教研室

[2] 中国药品生物制品检定所

来源：

免疫学杂志 | 2007年 / 02期

关键词：

志贺毒素ⅡB亚基; 单克隆抗体; 生物学特性;

D O I：

10.13431/j.cnki.immunol.j.20070043

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的制备出高效价的抗重组志贺毒素ⅡB亚基(rStx2B)单克隆抗体。方法以融合蛋白EspA-Stx2B作为抗原,免疫Balb/c小鼠,以未免疫的Balb/c小鼠脾细胞为饲养细胞;运用细胞杂交瘤技术制备,运用间接ELISA法筛选产生针对rStx2B的单克隆抗体细胞株;体内诱生法产生腹水,饱和硫酸铵沉淀法初步纯化,再采用HiTraprProteinA柱进一步纯化,快速定性试纸鉴定McAb的Ig亚型,采用间接ELISA法相加实验鉴定抗原识别表位。结果获得3株产生针对rStx2B的单克隆抗体细胞株Stx2B-1H9、Stx2B-1H10、Stx2B-3E5,Ig亚型分别为IgG1κ型,IgG2aκ型,IgG2bκ型,亲和力常数分别为7.36×108、6.94×108、5.85×108。结论成功制备3株稳定分泌抗rStx2B的杂交瘤细胞株,产生的McAb特异性好,亲和力高,为应用这些单克隆抗体建立免疫亲和层析法纯化天然志贺毒素Ⅱ,鉴定Stx2B的表位,研究针对EHECO157:H7感染的治疗性抗体奠定了基础。

引用

页码：148 / 151

页数：4

共 4 条

[1] 抗Stx2B单链抗体基因的构建及在大肠杆菌中的分泌表达 [J].