Ghrelin对脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞炎症信号通路Akt、NF-κB和iNOS的影响

【目的】观察生长激素释放肽(ghrelin)对脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞(AM)炎症信号通路蛋白激酶B(Akt)、核因子-κB(NF-κB)及诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)的影响。【方法】24只SD雄性大鼠随机分为假手术(Sham)组、脓毒症(CLP)组、ghrelin干预(CLP+ghrelin)组与ghrelin对照(Sham+ghrelin)组。盲肠结扎穿孔(CLP)构建大鼠脓毒症模型,分别于术后3 h与5 h腹腔注射20 nmol/kg ghrelin进行干预。观察各组肺组织病理改变并评分;从支气管肺泡灌洗液(BALF)中提取AM,ELISA测定BALF中炎症因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的水平,qPCR测定AM的IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达水平,免疫荧光、免疫印迹检测AM的NF-κB p65、IκBα、p-IκBα等NF-κB信号蛋白、Akt、p-Akt等Akt信号蛋白和iNOS蛋白水平。【结果】Ghrelin干预组肺组织病理学评分[(6.7±0.8)分]、BALF中IL-1β[(146±12)pg/mL]和IL-6[(182±10)pg/m L]分别较脓毒症组[(10.3±0.7)分、(263±17)pg/mL和(273±5)pg/mL]降低了35.4%、44.5%和33.3%,组间差异有统计学意义(P<0.05),ghrelin干预组BALF中TNF-α与脓毒症组差异无统计学意义。Ghrelin干预组AM的IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的表达水平分别较脓毒症组下调54.38%、53.6%和46.42%(P<0.05),且ghrelin干预组AM胞核NF-κB p65与胞浆pIκBα、p-Akt、iNOS表达较脓毒症组减少,分别减少32.58%、45.42%、27.6%和48.33%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组与ghrelin对照组上述指标差异无统计学意义。【结论】Ghrelin可降低脓毒症大鼠AM炎症调控信号通路蛋白Akt、NF-κB和iNOS的活性,进而下调AM促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6的表达,减轻脓毒症急性肺损伤。