抗HBsAg人IgG在CHO细胞中表达的影响因素探讨

目的探讨CHO-HB2细胞株表达抗HBsAg人IgG的影响因素。方法观察CHO-HB2细胞表达抗体的稳定性不同培养基以及添加剂的效用细胞接种密度和培养持续时间的选择金属离子Zn2+诱导表达的作用,以及滚瓶的培养效果。结果CHO-HB2细胞的亚克隆株F4经液氮冻存半年多复苏后,在无氨甲喋呤MTX的培养基中连续传代第2个月,抗体表达量开始下降,5个月时接近用MTX施加选择压力前的基础水平。在培养基中添加多种氨基酸和维生素,并加入适量的Zn2+诱导金属硫蛋白启动子,可使表达量明显增加。滚瓶培养可进一步增加抗体的表达量,在无蛋白的无血清培养基中的表达量,从6.2mg/L提高到28mg/L。结论应及时用MTX对细胞株进行再加压筛选,以保持细胞稳定表达抗体的能力。通过优化培养条件,使用完全无蛋白的无血清培养基,可收到较好的效果,且有利于表达抗体的纯化。