里氏木霉木聚糖酶基因XYN2的克隆与表达

被引:9
作者
王向明 [1 ]
欧阳嘉 [2 ]
严明 [1 ]
许琳 [1 ]
机构
[1] 南京工业大学制药与生命科学学院
[2] 南京林业大学化学工程学院
关键词
RT-PCR; Trichoderma reeseiXYN2基因; 酿酒酵母; 克隆; 表达;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
采用RT-PCR(reverse-transcription PCR assay)技术,从里氏木霉QM9414 mRNA中扩增出木聚糖酶基因XYN2,并与质粒pYX212相连,构建了组成型表达载体pYX212/XYN2.将此重组质粒转化入酿酒酵母菌株YPH499进行表达.分析了不同碳源、温度、摇瓶转速、初始pH对其产酶的影响.实验结果表明,最佳碳源是葡萄糖,最佳转速是260 r/min,最佳初始pH是6.0.优化重组菌的发酵条件后得到的最大酶活为0.55 IU/mL.
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