大肠杆菌mtID基因和gutD基因的克隆、全序列测定和高效表达

被引：26

作者：

刘俊君

彭学贤

王海云

莽克强

机构：

[1] 中国科学院微生物研究所植物生物工程实验室

[2] 中国科学院微生物研究所植物生物工程实验室北京

[3] 北京

[4] 北京

来源：

生物工程学报 | 1995年 / 02期

关键词：

1-磷酸甘露醇脱氢酶基因(mtlD); 6-磷酸山梨醇脱氢酶基因(gutD); 序列分析; 基因; 表达; 大肠杆菌;

D O I：

10.13345/j.cjb.1995.02.011

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

使用指示性培养基,筛选含有正常甘露醇操纵子和山梨醇操纵子的大肠杆菌菌株。从细菌染色体DNA中,通过多聚酶链式反应(PCR)扩增出1-磷酸甘露醇脱氢酶基因(mtlD)和6-磷酸山梨醇脱氢酶基因(gutD)。将它们分别克隆至载体pBluescript SK或KS以后,完成了这两个基因DNA的全序列分析。序列测定结果表明:所克隆的mtlD基因除编码区第96位密码子由GCA变成了GCT之外,其它序列与所报道的修正序列一致;所克隆的gutD基因除3＇端非编码区缺失一个碱基C之外,基因全序列与文献报道一致。完成此两个基因的大肠杆菌高效表达载体的构建之后,表达的1-磷酸甘露醇脱氢酶和6-磷酸山梨醇脱氨酶分别占菌体可溶性蛋白的24.79％和29.38％。

引用

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