植物monellin甜蛋白基因的细菌化改造合成及其在大肠杆菌中的表达

根据西非植物Ｄｉｏｓｃｏｒｅｏｐｈｙｌｌｕｍ　ｃｕｍｍｉｎｉｓｉｉ果实中分离到的ｍｏｎｅｌｌｉｎ甜蛋白的氨基酸序列，首次按照细菌优化密码子，人工合成了全长２９４ｂｐ的ｍｏｎｅｌｌｉｎ甜蛋白基因。克隆后序列分析表明，所获得基因与设计相符。构建了该基因的表达载体ｐＧＥＳＰ９。经４２℃诱导表达，发现所合成甜蛋白基因可在大肠杆菌ＢＬ２１中高效表达，表达量占菌体可溶性蛋白的２２．８％。分离纯化ｍｏｎｅｌｌｉｎ，经测定其甜度是相同重量蔗糖的１１００倍，且甜味纯正持久。