血管内皮生长因子基因治疗犬闭塞性血管病的初步研究

目的探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗犬闭塞性血管病的可行性，并对其安全性进行初步观察。方法构建了重组ＶＥＧＦ基因的真核表达载体。在基因转移前３天，肌肉内注射肌肉再生剂丁哌卡因（ｂｕｐｉｖａｃａｉｎｅ），并通过基因缝线和直接注射法，向血管闭塞症犬（ｎ＝５）的肌肉内转移重组ＶＥＧＦ基因（０．５ｍｇ／ｋｇ），应用ＲＴ－ＰＣＲ技术观察ＶＥＧＦ基因的表达，通过血管造影观察ＶＥＧＦ基因导入犬体内的生物效应；并应用临床自动血液生化分析仪和眼底镜进行转基因的安全性观察。结果转ｐｃＤＮＡ３／ＶＥＧＦ基因２８天后，缺血区肌肉组织内ＶＥＧＦ的表达明显高于对照单纯转ｐｃＤＮＡ３组；１４天后血管造影可见明显新生血管和侧枝循环的形成，２８天后更明显，一年后未见血管无限制生长；血液生化测定未见明显副作用。结论肌肉内转移ＶＥＧＦ基因通过促进血管新生和侧枝循环建立，促进血流恢复，经一年连续观察，无明显毒副作用，为闭塞性血管病的治疗，提供一种新的有效方法。