基因枪法转化籼稻有关因素的评价

利用基因枪轰击水稻未成熟胚及未成熟胚诱导来源的愈伤组织，对国内外16个籼稻品种进行了转化。设置不同的基因枪转化参数，并在培养基中添加各种植物激素、甘露醇以及2－N－吗啉－乙基磺酸（简称MES）来改善继代过程中籼稻愈伤组织的生长状态。基因枪转化的操作参数（包括金粉浓度和DNA含量、基因枪氦气压力、轰击受体的不同状态）对转化频率有重要影响；在继代培养基中添加MES（500mg／L）作为缓冲剂，可以减少籼稻愈伤组织褐化现象的发生；在诱导和继代培养基中补加NAA（0．5mg／L），KT（0．2mg／L）可改进愈伤组织质量，进而提高再生频率；在继代培养基中补加低浓度的ABA（1mg／L）和甘露醇（20g／L），能普遍改善愈伤组织生长状况，减少褐化现象的产生，得到较多结构致密的颗粒状抗性愈伤。获得了再生的转化植株，经检测表现出对Basta的抗性。