人参皂苷Rg1对S-亚硝基化谷胱甘肽引起内皮细胞线粒体依赖损伤的保护作用研究

目的研究人参皂苷Rg1对S-亚硝基化谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)引起内皮细胞损伤的保护作用,并初步探讨可能的分子机制。方法建立S-亚硝基化谷胱甘肽损伤内皮细胞模型,四甲基偶氮唑蓝法检测S-亚硝基化谷胱甘肽对内皮细胞存活率影响,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核聚缩。人参皂苷Rg1 10,20,40μmol·L-1预处理内皮细胞24 h,加S-亚硝基化谷胱甘肽损伤观察细胞存活率。乳酸脱氢酶试剂盒检测乳酸脱氢酶释放。JC-1染色检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,ΔΨm)变化。Western blot法检测bcl-2,bax,cytochrome C(cyt C),cleaved caspase 9,procaspase 9,cleaved caspase 3,pro-caspase 3蛋白表达。结果 S-亚硝基化谷胱甘肽抑制内皮细胞增殖。Rg1(20,40μmol·L-1)预处理24 h可显著减弱S-亚硝基化谷胱甘肽引起内皮细胞存活率降低(P<0.05)和乳酸脱氢酶释放(P<0.05)。Rg1可抑制S-亚硝基化谷胱甘肽引起的ΔΨm下降,抑制S-亚硝基化谷胱甘肽引起的线粒体依赖凋亡蛋白bcl-2/bax,cyt C,cleaved caspase 9/caspase 9,cleaved caspase 3/caspase 3蛋白表达上调,提示Rg1可抑制内皮细胞线粒体依赖凋亡。结论人参皂苷Rg1可减少S-亚硝基化谷胱甘肽引起内皮细胞凋亡,其作用机制与抑制线粒体依赖凋亡通路密切相关。