高密度培养大肠杆菌YK537/pSBHL-11生产重组人细胞白介素

在 Ｂ． Ｂｒａｕｎ Ｅ Ｓ １０ 型１５ Ｌ 和 Ｎ Ｂ Ｓ Ｂｉｏ Ｆｌｏ ３０００ 型５ Ｌ 发酵罐中，利用补料分批培养技术高密度表达培养含重组质粒ｐ Ｓ Ｂ Ｈ Ｌ １１ 的大肠杆菌 Ｙ Ｋ５３７ ，生产重组人白细胞介素 ３（ Ｉ Ｌ ３） ，发现在发酵过程中，限制性流加甘油，控制溶解氧在３０ ％ ～４０ ％ 左右、３０ ℃生长１１ｈ ，４２ ℃诱导培养４ｈ ，能将发酵液中最终菌体密度从 Ｏ Ｄ１６６００ 提高到 Ｏ Ｄ５３６００（ 相当于每升发酵液含１０６ 克湿菌体） ，并且保持了白细胞介素 ３ 的表达量，占菌体总蛋白的３０ ％ 左右，含量超过３３ ％ ｇ／ Ｌ，使 Ｉ Ｌ ３ 包涵体产量从湿重２２ｇ／ Ｌ 提高到８５ ｇ／ Ｌ，纯化步骤比较简单，超声破菌后经两次洗涤纯度就达到７０ ％ 以上。