香石竹斑驳病毒的鉴定和RT-PCR检测

被引：8

作者：

孔宝华

蔡红

刘进元

陈海如

常胜军

李文君

段永嘉

机构：

[1] 云南农业大学云南省植物病理重点实验室

[2] 清华大学生物科学与技术学院

来源：

植物保护 | 2002年 / 01期

关键词：

香石竹; 香石竹斑驳病毒; 鉴定; RTPCR检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

S436.8 [观赏园艺类病虫害]; S432.41 [];

学科分类号：

摘要：

从表现为叶斑驳、花碎色症状的香石竹病株上获得一病毒分离物 ,电镜负染观察到直径为 2 8～ 33nm的球状粒子。病毒提取液经紫外光测定呈典型核蛋白吸收曲线 ,OD2 60 /OD2 80 =1 70 ;血清学反应与CarMV抗血清出现明显的沉淀线。通过以上实验结果 ,确定该病毒分离物为香石竹斑驳病毒 (carnationmottlevirus ,CarMV)。根据该病毒的RNA序列设计引物 ,对病健材料进行了RT PCR检测 ,结果从感病材料中扩增出大约 6 0 0bp的特异片段 ,而健康植物无此扩增带。将PCR产物连接 pGEM-T-easy载体 ,转化大肠杆菌JM 10 9,得到了含目的片段的重组子 ,经双脱氧序列分析 ,与Guilley报道的序列对应部分的核苷酸序列基本一致 (其同源性达 96 % ) ,最低检出病毒核酸含量为 5ng ,表明应用RT PCR检测香石竹斑驳病毒是可行的

引用

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