TaqMan荧光定量PCR检测1型登革热病毒及临床应用

被引：1

作者：

白志军 ^{[1
,2
]}

刘建伟 ^{[1
]}

洪文艳 ^{[1
]}

任瑞文 ^{[1
]}

陈万山 ^{[3
]}

卢业成 ^{[3
]}

张复春 ^{[3
]}

方美玉 ^{[1
]}

林立辉 ^{[1
]}

机构：

[1] 广州军区疾病预防控制中心疾病控制科

[2] 广州市疾病预防控制中心病毒免疫科

[3] 广州市第八人民医院

来源：

中国媒介生物学及控制杂志 | 2010年 / 21卷 / 03期

关键词：

登革热1型病毒; 荧光定量RT-PCR; TaqMan探针; 检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

R440 [];

学科分类号：

摘要：

目的建立登革热1型病毒(DV1)TaqMan荧光定量PCR快速检测方法及应用于临床诊断。方法根据DV15′端非编码区基因保守序列,设计一套特异性引物和TaqMan探针。用4个血清型DV标准毒株为对照,收集40份DV1临床血清为检测标本。通过对DV1标准毒株RT-PCR后,采用体外转录方式获得RNA模板作为阳性对照,检测所建立TaqMan荧光定量PCR方法的特异性。取DV-IgM/IgG用ELISA检测患者血清,将TaqMan荧光定量PCR和DV-IgM/Ig GELISA进行敏感性比较。结果所建立方法的最低检测限约为每反应10个基因拷贝。发病后不同时间采集的登革热患者血清标本检测结果为:发病1～3d的患者RT-PCR阳性检出率最高(81.25%);4～6dELISA-IgM检出率最高(85.00%);7d后ELISA-IgG检出率最高(75.00%)。结论在登革热的早期诊断中建立的RT-PCR具有较高的敏感性、特异性和重复性,可作为DV1的快速诊断方法。

引用

页码：229 / 232

页数：4

共 6 条

[1] 虫媒传染病[M]. 军事医学科学出版社 , 方美玉,林立辉,刘建伟主编, 2005
[2] Rapid detection, serotyping and quantitation of dengue viruses by TaqMan real-time one-step RT-PCR[J] . Yong Yean Kong,Chong Heng Thay,Tan Chong Tin,Shamala Devi.Journal of Virological Methods . 2006 (1)
[3] Molecular Amplification Assays for the Detection of Flaviviruses[J] . Robert S Lanciotti.Advances in Virus Research . 2003
[4] Dengue: An Escalating Problem[J] . Robert V. Gibbons,David W. Vaughn.BMJ: British Medical Journal . 2002 (7353)
[5] Evaluation of ELISA-based sero-diagnosis of dengue fever in travelers
Schwartz, E
Mileguir, F
Grossman, Z
Mendelson, E
[J]. JOURNAL OF CLINICAL VIROLOGY, 2000, 19 (03) : 169 - 173
[6] The global pandemic of dengue/dengue hemorrhagic fever: current status and prospects for the future. Gubler,DJ. Annals Academy of Medicine Singapore . 1998

← 1 →