中国仓鼠成纤维细胞(Wg3-h)乌本苷抗性突变型的筛选和鉴定

乌本苷是质膜Na+、K+ATP酶的特异性抑制剂。在3.0 mM K+的培养液中,0.5mM浓度的乌本苷可完全抑制野生型Wg 3-h细胞的生长;而在0.3 mM K+的培养液中,则只需0.025 mM的药物浓度即可。以5 mM乌本苷为选择标准,本文作者以一步群选法从Wg 3-h细胞中选出16个抗性克隆（OuαR）。OuαR表型稳定,在无药物选择压力长达一年之久的情况下仍保持不变。比较Ouαs和OuαR细胞的Na+/K+运输,发现OuαR细胞对乌本苷抑制作用的敏感性降低。OuαR细胞与Ouαs细胞两者在生长速度、对培养液的需求,对HAT培养液和洋地黄毒苷的敏感性方面,均无明显差异。运用扫描电镜技术,观察到一些在光学显微镜下所见不到的乌本苷对细胞的影响。本文还就蛋白质双向电泳分析的结果,对OuαR的本质作了探讨。OuαR遗传标记,可用于体细胞融合中杂种细胞的筛选。