脂质体介导CD基因转染SHG-44胶质瘤细胞凋亡的实验研究

被引：4

作者：

谢轩贵 ^{[1
]}

游潮 ^{[2
]}

机构：

[1] 成都市第一人民医院神经外科

[2] 四川大学华西医院神经外科

来源：

临床神经外科杂志 | 2008年 / 01期

关键词：

脑胶质瘤; 基因治疗; 凋亡; 胞嘧啶脱氨酶; 5氟-胞嘧啶;

D O I：

暂无

中图分类号：

R739.4 [神经系肿瘤];

学科分类号：

100115 [医学神经生物学];

摘要：

目的以含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因的pCMVCD重组表达质粒转染SHG-44胶质瘤细胞,体外观察5氟-胞嘧啶(5-FC)对转染CD基因的胶质瘤细胞的凋亡诱导作用。方法体外扩增、酶切鉴定pCMVCD质粒并采用DNA序列测定pCMVCD质粒中的CD基因;脂质体L ipofectam ine 2000介导pCMVCD质粒转染SHG-44细胞,G418筛选培养获取抗性细胞克隆(即SHG-44/CD细胞);免疫细胞化学检测SHG-44/CD细胞的CD基因蛋白水平表达;流式细胞仪、TUNEL实验及透射电子显微镜观察5-FC对表达CD基因的SHG-44/CD细胞凋亡的诱导作用。结果含CD基因的pCMVCD质粒成功转染进入SHG-44细胞,获取了含CD基因的SHG-44/CD细胞,免疫细胞化学染色显示SHG-44/CD细胞成功地表达了CD。在含5-FC的培养液中培养,SHG-44/CD细胞出现典型的凋亡形态,TUNEL显示凋亡细胞比例极高;透射电镜可见凋亡改变;流式细胞术检测凋亡率达18.6%,凋亡率呈剂量依赖性。结论建立了SHG-44恶性人脑胶质瘤细胞的CD/5-FC自杀基因系统。诱导SHG-44/CD胶质瘤细胞产生凋亡可能是脑胶质瘤CD基因疗法的重要机制。

引用

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页数：5

共 5 条

[1]

细胞凋亡的基础与临床.[M].彭黎明;王曾礼主编;.人民卫生出版社.2000,

[2]

实用免疫细胞化学与核酸分子杂交技术.[M].蔡文琴;王伯滰主编;.四川科学技术出版社.1994,

[3]

Apoptosis Induction With 5-Fluorocytosine/Cytosine Deaminase gene Therapy for Human Malignant Glioma Cells Mediated by Adenovirus [J].