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- [1] 口蹄疫病毒VP1抗原基因在模式植物叶绿体中的重组和表达.[D].孙萌.浙江大学.2003, 04
- [2] 植物基因工程.[M].王关林;方宏筠主编;.科学出版社.2002,
FMDV vp1基因在烟草中表达及转基因烟草的免疫效果
被引：1
作者：
王宝琴
张永光
王小龙
王永录
潘丽
王文秀
董金杰
吕建亮
机构：
[1] 南京农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所,南京农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所,中国农业科学院兰州兽医研究所,中国农业科学院兰州兽医研究所,中国农业科学院兰州兽医研究所,中国农业科学院兰州兽医研究所江苏南京中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州,甘肃兰州,江苏南京,甘肃兰州,甘肃兰州,甘肃兰州,甘肃兰州,甘肃兰州
来源：
关键词：
口蹄疫病毒;
表达;
烟草;
免疫;
抗体;
Balb/C小白鼠;
D O I：
暂无
中图分类号：
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号：
摘要：
通过三亲杂交法,构建克隆有阿克苏(Akesu/58) O 型口蹄疫病毒vp1 基因的双元表达载体pBin FMDVVP1。采用农杆菌介导法转化NC89烟草叶盘,经卡那霉素筛选,共获得49株抗性植株。对抗性植株总DNA进行目的基因的PCR检测,有40株阳性植株。对阳性植株总RNA进行目的基因的RT PCR检测,有21株阳性植株。将7株ELISA和Western blot检测阳性植株叶片提取物分别与弗氏佐剂乳化,在0、15、30 和45d 腹膜腔接种Balb/C小白鼠,于第4次免疫后第9d进行血清抗体检测;第12d用104SM50 LD的同源强毒进行攻击;攻毒后24h采血,通过乳鼠病毒血症试验判定攻击Balb/C小白鼠的发病和保护情况。结果表明:双元表达载体pBin FMDVVP1构建正确;vp1基因转入NC89烟草并获得表达;7组中有2组Balb/C小白鼠血清抗体呈阳性,攻毒保护率分别为100%和63%。证明2株转基因烟草表达的VP1蛋白具有较好的免疫原性,所免疫的2 组Balb/C小白鼠对同源强毒攻击有一定的抵抗能力。
引用
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