一种新的2型糖尿病血管并发症细胞研究模型：葡萄糖、胰岛素、低密度脂蛋白联合诱导血管内皮细胞损伤的研究

目的观察不同浓度的葡萄糖、胰岛素和氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）对内皮细胞的协同损伤作用,建立一种2型糖尿病血管并发症体外内皮细胞损伤模型。方法采用 L9（3～4）正交设计方法,将生长融合状的血管内皮细胞（ECV-304）随机分为9组,分别施加不同浓度的葡萄糖、胰岛素和 ox-LDL 条件液,培养24h 后观测细胞活性、细胞一般形态学和超微结构改变以及细胞凋亡情况。结果显微镜下见模型组细胞回缩变圆,轮廓分明,细胞内出现粗糙颗粒样变化；线粒体肿胀,嵴丢失,内质网结构模糊、肿胀,呈小泡状；琼脂糖凝胶电泳可见模型组有明显的细胞凋亡典型的阶梯状区带电泳图谱（DNA Ladder）。结论三因素对细胞有协同损伤作用,可以诱导细胞发生凋亡和细胞器结构发生变化,含100 mg/L ox-LDL、20 mmol/L 葡萄糖和100 mU/L 胰岛素的混合条件培养液对细胞的损伤最显著,可作为糖尿病血管并发症体外内皮细胞损伤模型的合适诱导条件液。