鉴别牛羊布鲁菌实时荧光定量PCR方法的建立

被引：8

作者：

苏娇 ^{[1
]}

王艳杰 ^{[1
]}

智达夫 ^{[1
]}

关平原 ^{[1
,2
]}

机构：

[1] 内蒙古农业大学兽医学院

[2] 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

来源：

畜牧与饲料科学 | 2013年 / 34卷 / 05期

关键词：

实时荧光定量PCR; 布鲁菌; 牛种布鲁菌; 羊种布鲁菌; Taqman探针;

D O I：

10.16003/j.cnki.issn1672-5190.2013.05.033

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

摘要：

[目的]建立准确、快速检测布鲁菌、羊种布鲁菌、牛种布鲁菌的方法。[方法]以BCSP31作为布鲁菌菌属特异性基因,以IS711插入元件作为布鲁菌菌种特异性标志,设计引物和Taqman探针;分别构建标准阳性质粒模板,将其10倍倍比稀释作多重实时荧光定量PCR标准曲线,评价多重实时荧光定量PCR反应体系的敏感性、特异性、重复性。[结果]建立了鉴别牛种、羊种布鲁菌的实时荧光定量PCR方法,并用该方法对临床样品进行检测。[结论]所建立的多重实时荧光定量PCR诊断方法能够快速、准确地鉴别牛种和羊种布鲁菌。

引用

页码：7 / 12

页数：6

共 16 条

[1]

Real-time PCR detection of Brucella abortus:a comparative study of SYBR green I,5-Exonuclease and hybridization probe assays. Newby DT,Hadfield TL,Roberto FF. Applied and Environmental Microbiology . 2003

[2]

Time-space clustering of human brucellosis,California,1973-1992. FOSGATE G T,CARPENTER T E,CHOMEL B B,et al. Emerging Infectious Diseases . 2002

[3]

Development of a diagnostic multiplex polymerase chainreaction microarray assay to detect and differentiateBrucella spp.. SCHMOOCK G,EHRICHT R,MELZER F,et al. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease . 2011

[4]

Real-Time multiplex PCR assay for detection of Brucella spp,B.abortus and B.melitensis. Probert WS,Schrader KN,Khuong NY,et al. Journal of Clinical Microbiology . 2004

[5] 布鲁菌病多重PCR快速检测方法的建立及应用 [J].

王晶钰 ;

张三东 ;

刘红彦 ;

李河林 ;

程媛媛 ;

李宇立 ;

战美娜 .

动物医学进展, 2010, 31(S1) (S1) :5-9

[6] 布鲁氏菌病的研究进展 [J].

毛景东 ;

王景龙 ;

杨艳玲 .

中国畜牧兽医, 2011, (01) :222-227

[7] 我国近年来布鲁氏菌病监测资料分析 [J].

张士义 ;

马汉维 .

中国人兽共患病杂志, 1999, (01) :57-58+52

[8] 布鲁氏菌病流行病学及分子生物学研究进展 [J].

尚德秋 .

中国地方病防治杂志, 1996, (06) :339-348

[9]

Novel identification and differentiation of Brucella melitensis , B. abortus , B. suis , B. ovis , B. canis , and B. neotomae suitable for both conventional and real-time PCR systems[J] . &nbspJournal of Microbiological Methods . 2008 (2)

[10] Comparison of seven commercial DNA extraction kits for the recovery of Brucella DNA from spiked human serum samples using real-time PCR [J].

Queipo-Ortuno, M. I. ;

Tena, F. ;

Colmenero, J. D. ;

Morata, P. .

EUROPEAN JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY & INFECTIOUS DISEASES, 2008, 27 (02) :109-114

← 1 2 →