柚皮苷对H2O2处理小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的影响

目的 :研究柚皮苷对体外培养过氧化氢（H2O2）处理的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的作用及抗氧化机制。方法:在体外培养的MC3T3-E1s细胞培养基中分别加入不同浓度（0.01 mmol·L-1、0.02 mmol·L-1、0.04 mmol·L-1）的柚皮苷作用48 h,接着加入0.5 mmol·L-1H2O2作用4 h,采用CCK-8法检测柚皮苷对成骨细胞活力的影响;采用碱性磷酸酶（ALP）、细胞丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）和谷胱甘肽（GSH）试剂盒检测MC3T3-E1成骨细胞内ALP、SOD活性和MDA、GSH含量及细胞上清LDH活性;用茜素红S染色法检测矿化结节数目;用Real time RT-PCR的方法检测成骨细胞内I型胶原（COL-I）、骨钙素（OCN）、转录因子Osterix和骨形态发生蛋白2（BMP-2）m RNA表达。结果:柚皮苷可增加H2O2损伤后MC3T3-E1细胞ALP活力（P<0.05,P<0.01）和矿化结节数目（P<0.05,P<0.01）,促进骨形成相关指标COL-I、Osterix、BMP-2和OCN m RNA表达（P<0.01）;柚皮苷提高H2O2损伤后MC3T3-E1细胞活力（P<0.05,P<0.01）,上调细胞内SOD活性和GSH含量并降低细胞中MDA含量和上清中LDH活性（P<0.01）。结论:一定浓度（0.01,0.02,0.04 mmol·L-1）的柚皮苷可以促进H2O2处理后MC3T3-E1细胞的骨形成,这种促进作用可能是通过降低氧化应激发挥抗氧化作用实现的。