环介导恒温扩增技术快速检测溶藻弧菌

被引:18
作者
丁文超 [1 ]
胡健饶 [2 ]
史雨红 [1 ]
李明云 [1 ]
陈炯 [1 ]
机构
[1] 宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室
[2] 杭州师范大学生命与环境科学学院
关键词
溶藻弧菌; OmpK基因; 环介导恒温基因扩增检测法;
D O I
暂无
中图分类号
S941 [鱼病学];
学科分类号
摘要
溶藻弧菌是中国南部水产养殖业中弧菌病的最主要病原菌,其快速检测具有重要意义。根据溶藻弧菌外膜蛋白OmpK基因序列,设计一套引物,通过条件优化,成功建立了针对致病性溶藻弧菌的环介导恒温扩增检测技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。应用LAMP技术,在65℃温育1h的条件下扩增溶藻弧菌基因组DNA,琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带。该研究建立的LAMP法特异性检出致病性溶藻弧菌,其检测下限比PCR法低一个数量级,相当于n(cell)=38/mL的菌液浓度,灵敏度更高。综合分析表明,LAMP技术是快速、简易、实地诊断溶藻弧菌的理想工具。
引用
收藏
页码:70 / 76
页数:7
相关论文
共 15 条
[1]   大黄鱼病原菌──溶藻弧菌的ELISA快速检测研究 [J].
鄢庆枇 ;
王军 ;
苏永全 ;
皮灵宝 ;
刘成荣 .
海洋科学, 2001, (09) :47-50
[2]  
Notomi T,Okayama H,Masubuchi H,Yonekawa T,Watanabe K,Amino N,&Hase T.Loop-mediated isothermal amplification of DNA. Nucleic Acids Research . 2000
[3]  
Savan R,Igarashi A,Matsuoka S,et al.Sensitive and rapiddetection of edwardsiellosis in fish by a loop-mediated isothermalamplification method. Applied and Environmental Microbiology . 2004
[4]  
Kawakami H,Kono T,&Sakai M.)Detection of fish nocardiosis by loop-mediated isothermal amplification. Journal of Applied Microbiology . 2006
[5]   溶藻弧菌单克隆抗体的制备及应用 [J].
宋晓玲 ;
黄倢 ;
史成银 .
水产学报, 2001, (06) :522-527
[6]  
Mori,Y,Nagamine,K,Tomita,N,Notomi,T.Detection of loop-mediated isothermal amplification reaction by turbidity derived from magnesium pyrophosphate formation. Biochemical and Biophysical Research Communications . 2001
[7]   19株海水鱼致病性弧菌OmpK基因序列及其抗原性分析 [J].
杨智慧 ;
李宁求 ;
白俊杰 ;
石存斌 ;
潘厚军 ;
叶星 ;
劳海华 ;
吴淑勤 .
中国水产科学, 2006, (05) :807-813
[8]  
Tracz DM,Backhouse PG,Olson AB,et al.Rapid detection of vibriospecies using liquid microsphere arrays and real-time PCR targetingthe ftsZ locus. Journal of Medical Microbiology . 2007
[9]  
Parida,M,Posadas,G,Inoue,S,Hasebe,F,Morita,K.Real-time reverse transcription loop-mediated isothermal amplification for rapid detection of West Nile virus. Journal of Clinical Microbiology . 2004
[10]   嗜水气单胞菌Lamp检测方法的建立及应用 [J].
程天印 ;
刘洵 ;
常小斌 .
中国兽医科学, 2007, (12) :1013-1016