Sa抗原相关蛋白质的研究

目的研究类风湿关节炎(RA)特异性抗sa抗体识别的Sa抗原,探讨Sa抗原的相关蛋白质。方法从人胎盘组织阴离子交换柱层析法纯化Sa抗原,应用免疫印迹法检测155例各种风湿病患者血清的抗Sa抗体,155例患者中类风湿关节炎71例,强直性脊柱炎11例、银屑病关节炎7例、反应性关节炎7例、幼年特发性关节炎4例、骨性关节炎5例、风湿性多肌痛6例、痛风6例、系统性红斑狼疮7例、干燥综合征10例、炎性肌病8例、混合性结缔组织病4例、白塞病6例、成人Still病3例。切取与免疫印迹法阳性条带相对应的电泳胶内条带,胰蛋白酶胶内酶解,用高效液相色谱-电喷雾-离子阱质谱鉴定目标蛋白质。以大肠杆菌重组表达目标蛋白质作为抗原,以免疫印迹法检测相应抗体。瓜氨酸化修饰重组蛋白质作为抗原,以免疫印迹法检测相应抗体。结果抗Sa抗体表现为相对分子质量为50 000(和)55 000的阳性印迹条带,在155例风湿病中,对RA的诊断敏感性和特异性分别为47．9％和95．2％。质谱鉴定Sa抗原相关蛋白质为波形蛋白(Vimentin)。抗波形蛋白抗体在RA组与其他风湿病组的阳性率差异有统计学意义(P=0．005),对RA的诊断敏感性和特异性分别为36．6％和83．3％,但与抗Sa抗体的一致性差(Kappa=0．316)。抗瓜氨酸化波形蛋白抗体阳性率在RA组较其他风湿病组高(P<0．01),对RA的诊断敏感性和特异性分别为49．3％和86．9％,且与抗Sa抗体的一致性较高(Kappa=0．746)。结论运用质谱技术鉴定的Sa抗原相关蛋白质波形蛋白,瓜氡酸化修饰后的抗原性与Sa抗原相仿,提示瓜氨酸化波形蛋白与Sa抗原密切相关。