转基因玉米T25数字PCR方法的建立与验证

被引:5
作者
李夏莹 [1 ]
武玉花 [2 ]
李俊 [2 ]
肖晓琳 [1 ]
张飞燕 [1 ]
梁晋刚 [1 ]
王顥潜 [1 ]
张旭冬 [1 ]
张秀杰 [1 ]
机构
[1] 农业农村部科技发展中心
[2] 中国农业科学院油料作物研究所
关键词
转基因玉米; T25; 基体标准物质; 微滴数字PCR;
D O I
10.13304/j.nykjdb.2019.0154
中图分类号
S513 [玉米(玉蜀黍)];
学科分类号
0901 ;
摘要
转基因安全管理和标识制度的实施需要标准化的检测方法和转基因检测标准物质,标准物质是获得准确、可靠、可比检测结果的保证。转基因玉米T25为我国批准进口用作加工原料的转基因植物。为加强对T25的监管,以T25基体标准物质为研究对象,建立数字PCR方法,并选择8家实验室,采用数字PCR联合定值测定。结果表明,T25/Adh1二重数字PCR系统具有良好的扩增特异性。初始模板量在100~10 000拷贝·μL-1之间可获得稳定、可靠的检测结果。通过多实验室协同定值说明T25/Adh1二重数字PCR方法准确、可靠。T25基体标准物质的量值为1.001 2,相对不确定度为0.001 6。研究表明建立的T25/Adh1二重数字PCR方法可以用于转基因玉米T25的定量检测,为转基因成分定量检测提供了物质基础和技术保证。
引用
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