SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测脑胶质瘤中RASSF1A mRNA

被引：10

作者：

高云霞

关明

苏兵

刘维薇

陈宇明

张万忠

吕元

机构：

[1] 复旦大学附属华山医院检验医学中心

[2] 复旦大学附属华山医院检验医学中心上海

来源：

复旦学报(医学版) | 2004年 / 06期

关键词：

RAS相关结构域家族蛋白1A; 胶质瘤; SYBR GreenⅠ荧光染料;

D O I：

暂无

中图分类号：

R739.4 [神经系肿瘤];

学科分类号：

100115 [医学神经生物学];

摘要：

目的　建立检测RASSF1A(RASassociationdomainfamily 1ARASSF1A)mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR的方法 ,了解脑胶质瘤中RASSF1A的表达水平 ,研究RASSF1AmRNA的表达和肿瘤恶性程度的关系。方法　构建克隆载体作为定量模板 ,RocheLightCycler 定量检测 4 8例不同恶性程度胶质瘤组织和 6例正常脑组织标本。结果　 4 8例脑胶质瘤组织中有 5例未检出RASSF1AmRNA。与内参照三磷酸甘油醛脱氢酶基因GAPDH(glyceraldehycle 3 phosphatedehydrogenase,GAPDH)比较后 ,RASSF1AmRNA的表达范围从 0 .0 8～ 1.0 0 /μg ,均值为 (0 .5 0± 0 .0 0 4 ) /μg。 6例正常脑组织标本均有RASSF1AmRNA的表达 ,范围从 0 .70～ 1.80 /μg ,均值为 (1.0 5± 0 .0 8) /μg。各期胶质瘤中RASSF1A的mRNA的表达水平均低于正常脑组织 ,但胶质瘤不同病理级别组之间的差异无显著意义。结论　胶质瘤中RASSF1A的mRNA的表达水平均低于正常脑组织。成功地建立了SYBRGreenⅠ实时定量检测RASSF1A基因表达方法 ,为研究RASSF1A表达水平下调的机制、表达水平和肿瘤的恶性程度、转移、预后等的关系打下基础

引用

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