清肠化湿方通过激活AhR/IL-22缓解小鼠溃疡性结肠炎的作用机制研究

目的通过构建溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis, UC)小鼠模型,从芳香烃受体(AhR)角度,观察清肠化湿方对白细胞介素-22(IL-22)分泌及黏蛋白-2(MUC-2)与紧密连接蛋白(Claudin4)表达的作用,阐述其缓解小鼠UC的作用机制。方法用DSS构建UC小鼠模型,每日观察小鼠体质量、粪便形状、隐血情况,同时进行疾病活动指数(DAI)评分。给药结束后测量小鼠结肠长度,HE染色观察结肠病理情况,qPCR检测结肠组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、AhR的mRNA。Western blot检测结肠MUC-2、AhR、细胞色素P4501A1酶(CYP1A1)、IL-22、Claudin4表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠DAI评分上升(P<0.01),结肠长度缩短(P<0.01),结肠黏膜病理受损情况严重;AhR的mRNA表达下降(P<0.05),IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA表达上升(P<0.05,P<0.01);MUC-2、AhR、CYP1A1、IL-22、Claudin4蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,美沙拉嗪组、清肠化湿方组DAI评分降低(P<0.01),结肠长度变长(P<0.01),结肠黏膜病理情况改善;IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA表达下降(P<0.05,P<0.01);MUC-2、CYP1A1、Claudin4蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,清肠化湿方组AhR的mRNA表达上升(P<0.05),AhR、IL-22蛋白表达升高(P<0.01)。与清肠化湿方组比较,清肠化湿方+TMF组小鼠DAI评分上升(P<0.01);结肠长度缩短(P<0.05);结肠黏膜病理受损情况严重;IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA表达上升(P<0.01);MUC-2、AhR、CYP1A1、IL-22、Claudin4蛋白表达下降(P<0.01)。结论清肠化湿方能够激活AhR,上调CYP1A1表达,促进IL-22生成,抑制炎症水平,同时增加MUC-2及Claudin4的表达,从而缓解UC。