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同源重组置换衣藻叶绿体chlL基因及其同质化鉴定
被引:5
作者:
范国昌
苏宁
张中林
钱凯先
沈桂芳
机构:
[1] 中国农业科学院生物技术研究中心!北京,浙江大学生物技术系,杭州,中国农业科学院生物技术研究中心!北京,中国农业科学院生物技术研究中心!北京,中国农业科学院生物技术研究中心!北京,中国农业科学院生物技术研究中心!北京
来源:
关键词:
衣藻叶绿体;
同源重组;
chlL基因;
aadA基因;
D O I:
10.13865/j.cnki.cjbmb.2000.01.015
中图分类号:
Q503 [生物化学技术];
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号:
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要:
设计以 aad A基因置换衣藻 chl L基因并作为转基因衣藻筛选标记 ,将 chl L基因两侧的基因片段 clp P- trn L- pet B- chl L5′- 3′作为同源片段 ,构建衣藻叶绿体同源重组质粒 p64D.通过改进的基因枪法转化程序 ,将此质粒轰击入衣藻叶绿体 .经抗性筛选、暗培养及 PCR、Southern- blotting等鉴定 ,证实衣藻叶绿体基因组中大部分 chl L结构基因已被外源基因 aad A所置换
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