人重组GDNF及其生物活性研究

被引:24
作者
陈哲宇
陈秀青
路长林
孙建新
吴祥甫
机构
[1] 第二军医大学神经生物学教研室
[2] 中国科学院上海生物化学研究所
关键词
人胶质细胞源神经营养因子; 基因克隆; 基因表达; 多巴胺能神经元;
D O I
暂无
中图分类号
Q343.11 [];
学科分类号
摘要
从人胎脑组织中提取总RNA,以RTPCR方法获取编码胶质细胞源神经营养因子(GDNF)成熟蛋白的cDNA。将人GDNFcDNA插入含T7启动子的质粒pET28a(+),构建表达质粒pETGDNF,转化大肠杆菌获得表达菌株BLGDNF,经诱导表达的GDNF形成包含体。凝胶自动扫描分析表明,表达量约占菌体总蛋白的30%以上。用纯化的GDNF蛋白免疫新西兰兔制备了GDNF抗血清。纯化和复性的GDNF蛋白能显著促进多巴胺能神经元的存活。
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