形成三螺旋DNA的寡核苷酸抑制内皮细胞组织因子基因的表达

被引：2

作者：

李黔宁

应大君

戴光明

郑健

肖道虹

邓志宽

刘勇

刘立杰

周永琴

任萍

机构：

[1] 第三军医大学新桥医院神经内科

[2] 第三军医大学解剖学教研室

[3] 第三军医大学

来源：

中国动脉硬化杂志 | 2002年 / 03期

关键词：

寡核苷酸,三螺旋型; 基因,组织因子; 基因表达; 内皮,血管;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q523 [脱氧核糖核酸（DNA）];

学科分类号：

071010 ; 081704 ;

摘要：

为探讨形成三螺旋DNA的寡核苷酸是否对切应力诱导内皮细胞组织因子基因表达有抑制作用 ,针对内皮细胞组织因子基因启动子内切应力反应元件 ,设计反向脱氧寡核苷酸序列T2 1GTa,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成脱氧寡核苷酸。在脱氧寡核苷酸的 3’末端进行硫代磷酸酯修饰。应用电泳迁移分析观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性。在ECV30 4内皮细胞株观察γ 32P标记硫代磷酸酯三螺旋DNA寡核苷酸的细胞摄取及其对组织因子基因表达的影响。结果发现 ,硫代磷酸酯寡核苷酸T2 1GTa ps与靶序列能形成三链DNA ,其Kd值为 3 .6× 1 0 1 0 mol L。在内皮细胞株ECV30 4细胞 ,三螺旋DNA寡核苷酸 ps (T2 1GTa ps)的细胞吸收率为 1 1 .65 % ,主要分布在核沉淀 ,约占吸收总量的 77.2 5 % ,显著降低内皮细胞组织因子基因mRNA表达及组织因子蛋白合成的平均吸光度值 ,显著降低组织因子的促凝活性。此结果提示 ,硫代磷酸酯寡核苷酸T2 1GTa ps对内皮细胞组织因子基因表达具有较好的抑制作用

引用

页码：190 / 194

页数：5

共 9 条

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