纤维素酶E5基因在E.coli中的克隆与表达

被引：14

作者：

沈雪亮

夏黎明

刘景晶

机构：

[1] 浙江大学化学工程与生物工程系

[2] 中国药科大学生物制药学院浙江杭州

[3] 浙江杭州

[4] 江苏南京

来源：

浙江大学学报(工学版) | 2001年 / 06期

关键词：

纤维素酶; E5基因; 重组; 表达; 胞外分泌;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q785 [转化及克隆]; Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

将含纤维素酶 E5基因的质粒 p D5 4 1用 Nco I和 Eco R I双酶切后 ,经电泳分离获取含 E5基因的小片段 ,将该片段定向插入表达质粒 p SE4 2 0的多克隆位点上 ,进一步将重组 DNA转入大肠杆菌宿主 .采用刚果红染色法检测出选择性平板上的转化子具有羧甲基纤维素酶 (CMCase)活性 .摇瓶产酶试验进一步表明 ,基因重组后的大肠杆菌能高效表达 E5基因并将产物分泌出胞外 ,培养液中可检测到的CMCase活力达 31.6 U/ m L .该研究结果为进一步构建高效纤维素分解菌株打下了良好的基础 ,具有重要的学术意义和实际应用价值 .

引用

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