定量测定甲胺磷残留的间接竞争ELISA的建立和初步应用

以水溶性碳化二亚胺法将甲胺磷（ＭＴＰ）分子偶联到牛血清白蛋白（ＢＳＡ）上，用此合成的免疫原复合物制备了特异性的兔抗甲胺磷多抗血清。抗血清的ＥＬＩＳＡ效价为１∶１２８００～１∶５１２００；抗血清与乙酰甲胺磷的交叉反应率为１０．５％，与供试的其它９种有机磷农药的交叉反应率均小于２．８％。用同样的方法合成了甲胺磷－卵清蛋白复合物作为包被抗原，建立了适于环境中甲胺磷残留分析的间接竞争ＥＬＩＳＡ工作程序，在明确了该方法的工作条件及其基本参数的基础上，用建立的ＥＬＩＳＡ方法测定了稻谷和小白菜叶片样品中的甲胺磷残留量，并与ＧＣ方法的测定结果进行了比较。结果表明：建立的ＥＬＩＳＡ方法对甲胺磷纯品的最低检测量为０．８５ｎｇ／ａｓｓａｙ，线性检测范围为０．０３２～５００μｇ／ｍＬ；在该范围内，标准曲线的批内和批间变异系数分别为３．７９％和４．４３％；稻谷和小白菜叶片样品中添加甲胺磷后的平均回收率分别９０．３％和９３．２％；在测定的３１份稻谷和４５份小白菜样品中，ＥＬＩＳＡ检测为阳性的样品百分率分别为１６．１％和４６７％，阳性样品中甲胺磷的残留量为０．０２４～７４．９６２ｍｇ／ｋｇ；ＥＬＩＳＡ测定结果与ＧＣ测定结果呈显著的线性