影响根癌农杆菌介导甜瓜转化NP-1基因的外部因子研究

以新疆伽师、皇后两个甜瓜品种的子叶切块与农杆菌共培养 ,将NP - 1基因导入甜瓜。以再生植株的PCR检测阳性和卡那霉素抗性作为转化植株的初步判定。研究了甜瓜转化的外部因子 :甜瓜子叶外植体经 3d预培养 ,重悬于MS液体培养基使菌液浓度达OD6 0 0 为 0 6后进行侵染 8～ 12min ,再经 3d共培养对转化最为有利 ;在侵染前进行 0 2mg L甘露醇高渗处理可提高转化率 6 6 % ,乙酰丁香酮在甜瓜的转化中并未有显著影响。转化中卡那霉素合适筛选压力为 10 0mg L ,转化后抑菌氨苄青霉素浓度为 5 0 0mg L有利于获取转化植株 ,转化率可达到 12 %。