虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ-(HWTX-Ⅰ)28肽类似物的化学合成与活性鉴定

被引:10
作者
廖黔宁
罗静初
周培爱
顾孝诚
梁宋平
机构
[1] 北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京,湖南师范大学生命科学学院!长沙
关键词
虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ; 固相多肽合成; 类似物; 结构与功能关系;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.1999.05.016
中图分类号
Q516 [蛋白质的一级结构];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
虎纹捕鸟蛛毒素-(huwentoxin-,HWTX-)是从我国虎纹捕鸟蛛毒素中分离纯化得到的一种多肽类神经毒素.该多肽分子由33个氨基酸残基组成,含三对二硫键.其一级结构和三级结构均已测定.弄清该毒素的活性部位,是研究其结构功能关系的基础.用固相Fmoc化学合成的方法,合成了虎纹捕鸟蛛-的28肽类似物.该突变体去掉了天然毒素分子N端的Alal和C端的Lys30-Trp31-Lys32-Leu33共5个残基.用氧化还原型谷胱甘肽法完成二硫键配对,并用HPLC进行纯化,所得突变体与天然HWTX-的紫外光谱相似.质谱鉴定确认合成产物正确,分子量为3124,浓度为1×10-5g/ml的突变体能可逆阻断小白鼠膈神经-膈肌的接头传递,阻断时间为60~70min.与天然毒素比较,活性有所下降.结果说明HWTX-的N端、C端残基对其生物活性有一定影响,但不是位于活性中心的重要残基.由结果推测,虎纹捕鸟蛛毒素-的活性中心位于该分子中连接β-折叠的回环区
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