过氧化物酶体增殖体激活受体γ2表达诱导NIH3T3细胞向脂肪细胞分化

被引：10

作者：

左祥生

李果

骆天红

李纪平

刘赟

孙卫华

罗敏

机构：

[1] 上海第二医科大学附属瑞金医院上海内分泌研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院上海内分泌研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院上海内分泌研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院上海内分泌研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院上海内分泌研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院上

来源：

中华内科杂志 | 2001年 / 04期

关键词：

过氧化物酶体增殖体激活受体γ2; NIH3T3细胞; 逆转录病毒科; 脂细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R589.2 [脂肪代谢障碍];

学科分类号：

100201 [内科学];

摘要：

目的　通过应用重组逆转录病毒介导小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ２（ｍＰＰＡＲγ２）基因整合入ＮＩＨ３Ｔ３细胞基因组中进行表达，并研究其功能。方法　从经测序证实含正确序列ｍＰＰＡＲγ２的重组质粒ｐｃＤＮＡ３／ｍＰＰＡＲγ２中，双酶切下ｍＰＰＡＲγ２全长ｃＤＮＡ序列，亚克隆入逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ中构建重组逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ／ｍＰＰＡＲγ２。对ｐＧＣＥＮ／ｍＰＰＡＲγ２及ｐＧＣＥＮ进行包装及Ｇ４１８抗性筛选，收集病毒上清，感染靶细胞ＮＩＨ３Ｔ３细胞，进行Ｇ４１８抗性筛选并进行扩增。在含过氧化物酶体增殖体激活受体γ（ＰＰＡＲγ）激活物５，８，１１，１４二十碳四烯酸等分化介质中，诱导ＰＰＡγ２表达增加，使ＮＩＨ３Ｔ３细胞向脂肪细胞分化。结果　构建了含ｍＰＰＡＲγ２全长ｃＤＮＡ重组逆转录病毒载体，获得了滴度分别为５ｘ１０４ＣＦＵ／ｍｌ和６ｘ１０５ＣＦＵ／ｍｌ的ｐＧＣＥＮ／ｍＰＰＡＲγ２及ｐＧＣＥＮ的病毒上清。经油红Ｏ染色证实分化１０ｄ的表达ｍＰＰＡＲγ２的ＮＩＨ３Ｔ３细胞中明显积聚了较多的中性脂肪，其细胞形态也与体内成熟脂肪细胞相似。结论　本研究在体外建立了由ＰＰＡＲγ２诱导ＮＩＨ３Ｔ３细胞向脂肪细胞分

引用

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